色谱自动配制标准曲线详解
目标
用户给出一个储备液C,并输入需要配制的系列点的浓度,直接配制在2mL色谱小瓶中,定容体积为500-1000uL。为了适用于不同的检测项目,各个点的浓度和点数是随机的,
为方便叙述假设5个点,浓度分别为L1,L2,L3,L4,L5
难点
- 要想获得良好的精确性,自动进样针移取液体的体积必须处在进样针体积的10%-100%范围内
- 配制完毕需要进样到GC分析,所以必须有一支10uL的进样针用于GC1uL进样
- 定容体积为500~1000uL,至少还需要一支体积大于250uL的进样针,所以自动进样器需要具备同时安装2支不同体积进样针的能力才能完成配制过程
- 软件必须具备根据用户输入的各个点浓度自动计算每个点所需的储备液、稀释液体积
- 软件必须具备根据需要移取的储备液、稀释液体积从两支针中自动选择合适的针进行处理,以满足10%-100%要求
- 假设安装的两支进样针为10uL和500uL
- 1-50uL的体积必须由10uL进样针移取
- 50-1000uL的体积必须由500uL的进样针移取
- 对于超过进样针体积的溶剂,软件必须自动分配为多次完成,并且保证每次移取都满足10%-100%的要求假设计算出的体积时30.5uL,须由10uL进样针移取,理想的处理方式(快且准确)是分4次10uL、10uL、9uL、0.5uL
- 洗针溶剂的消耗,每个点的配制都需要移取储备液和稀释液,而且使用哪支针移取是根据输入自动选择的,每次用针前都需要满针洗针,洗针溶剂的消耗量比较大,通常使用的10mL洗针瓶根本不够用,后续的进样没有洗针液可用,需要用户随时添加
- 假设用两种溶剂洗针,每种溶剂洗3次,满针洗针,5个点中2个点是10uL进样针移取储备液、另外3个点是500uL进样
- 针移取储备液、500uL针移取稀释液
- 洗针溶剂的消耗量(10uL*3*2)*2+(500uL*3*2)*8=24.12mL
- 配制路径的计算,如果某个点的浓度与储备液的浓度相差较大时,储备液的移取量小于1uL,不能直接从储备液稀释得出,需要从已经稀释好的点为起点稀释出该点
- 定容完一个点,必须能够进行有效的混匀,因为定容好的点可能马上分析或者会被作为后面点的起点。
综上所属要完成GC自动配制标准曲线过程,软件与硬件需相互配合,精心优化才能实现
配制路径自动计算
联和层析的解决方案
- CTC DualArm PAL 或 CTC PAL RTC,可同时安装两支液体进样针,10uL、250/500uL
- 针对以上的问题专门研发了控制软件
- 根据储备液浓度和配制点的浓度自动计算配制路径和所需的储备液、稀释液体积
- 移取过程严格遵循10%-100%的物理限制
- 通过优化溶剂和标准品的添加过程,将洗针液的消耗控制在5mL一下,每种消耗2.5m
与市面上宣称具备自动配曲线功能的产品比较
Thermo RSH
- Thermo RSH的控制软件没有对配制曲线经过任何优化
- 只能实现添加标準品,用户必须自己计算并将稀释溶剂添加好
- 无法自动计算配制路径,不能逐级稀释,线性范围很窄
- Thermo的方案不具备任何实用价值
Agilent 7696A
- 7696A只能离线使用,配制完无法自动进样
- 控制软件没有对配制曲线经过任何优化
- 用户需要自己计算配制过程,然后将每个步骤输入控制软件
- 使用繁琐,一旦需要的浓度稍微变化就需要重新计算整个过程
- 对于用户而言需要自己计算、写脚本难度太大,实用价值低
- 7696A功能单一
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